Вирус гриппа свиней А/H1N1, который сейчас выделяют от людей в США и в Мексике, возможно обнаружить с использованием наборов реагентов производства ФНУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора:
«АмплиСенс Influenza virus A/B-FL» предназначен для выявления РНК вирусов гриппа А (Influenza virus A) и гриппа В (Influenza virus В) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией. Набор успешно прошел приемочные и медицинские испытания и в настоящее время его комплект регистрационной документации находится в Росздравнадзоре на выписке регистрационного удостоверения.
«АмплиСенс® Influenza virus A-тип-FL», предназначен для идентификации субтипов H1N1 и H3N2, вызывающих сезонный грипп человека (типирование гриппа А) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией. Набор может использоваться для научно-исследовательских целей.
Рекомендуемый алгоритм исследований при подозрении на грипп свиней с использованием наборов реагентов производства ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Этап №1: Исследование биологического материала на присутствие вирусов гриппа А с помощью набора реагентов «АмплиСенс Influenza virus A/B-FL»
При получении положительного результата по обнаружению вируса гриппа А на первом этапе, образцы кДНК, в которых была обнаружена РНК Influenza virus A исследуются дальше.
Этап №2: Исследование по идентификации вирусов гриппа А, вызывающих сезонный грипп человека(типирование гриппа А) с помощью набора реагентов «АмплиСенс Influenza virus A-тип-FL»
Интерпретация результатов исследования:
Обнаружив грипп А с помощью набора реагентов «АмплиСенс Influenza virus A/B-FL» и получив отрицательные результаты в исследовании с набором реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A-тип-FL», можно сделать вывод, что в образце присутствует нехарактерный для популяции людей вирус гриппа А (грипп свиней типа H1N1).
Такие образцы (изоляты) требуют детального исследования в НИИ гриппа, НИИ им. Ивановского, «Вектор» или в ФГУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, так как они являются потенциально пандемически-опасными.
Для выполнения правильного и полного ПЦР-анализа необходимо руководствоваться инструкциями к наборам реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A/B-FL» и «АмплиСенс® Influenza virus A-тип-FL» производства ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора.
Для этапа №1: Набор реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A/B-FL» производится в двух вариантах:
Вариант FEP. Набор реагентов для ПЦР-амплификации кДНК Influenza virus A и Influenza virus B с гибридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке». Раскапан по ПЦР-пробиркам (0,5 мл и 0,2 мл) «под воск», рассчитан на проведение 55 реакций амплификации, включая контроли.
Вариант FRT. Набор реагентов для ПЦР-амплификации кДНК Influenza virus A и Influenza virus B с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» для амплификатора Rotor Gene. Раскапан по ПЦР-пробиркам (0,2 мл) «под воск», рассчитан на проведение 55 реакций амплификации, включая контроли.
Для этапа №2: Набор реагентов «АмплиСенс® Influenza virus A-тип-FL» производится в двух вариантах:
Вариант FEP. Набор реагентов для ПЦР-амплификации и идентификации кДНК Influenza virus A субтипов H1N1 и H3N2 с гибридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке».Раскапан по ПЦР-пробиркам (0,5 мл и 0,2 мл) «под воск», рассчитан на проведение 55 реакций амплификации, включая контроли.
Вариант FRT. Набор реагентов для ПЦР-амплификации и идентификации кДНК Influenza virus A субтипов H1N1 и H3N2 с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» для амплификатора Rotor Gene. Раскапан по ПЦР-пробиркам (0,2 мл) «под воск», рассчитан на проведение 55 реакций амплификации, включая контроли.
Исследуемый материал: мазки из полости носа и ротоглотки, смывы из полости носа и ротоглотки, мокрота, фекалии; секционный материал (фрагменты пораженной части легких), секционный материал; от животных: фекалии больных животных, мазки, трахеальные смывы, внутренние органы (фрагменты трахеи и легких, селезенка, мозг), культуры вирусов.
Рекомендуемое специальное оборудование: Вариант FEP: амплификатор для микропробирок 0,5 мл «Терцик» («ДНК-Технология», Россия) или эквивалентный; для микропробирок 0,2 мл «Gradient Palm Cycler», («Corbett Research», Австралия) или эквивалентный. Флуоресцентный ПЦР-детектор, например, «AЛА-1/4» («BioSan», Латвия) или эквивалентный. Вариант FRT: амплификатор «Rotor-Gene» 3000/6000 («Corbett Research», Австралия).
Разработки наборов для идентификации специфического типа H1N1 гриппа свиней в настоящее время находятся в процессе передачи в серийное производство.
Оригинал временных рекомендаций по использованию наборов реагентов «АмплиСенс» производства ФГУН ЦНИИэпидемиологии Роспотребнадзора для анализа биологических образцов при подозрении на грипп свиней (PDF).
